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細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)——細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)外包

流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡注意事項(xiàng)介紹由普拉特澤生物流式檢測(cè)平臺(tái)總結(jié)歸納。普拉特澤生物流式檢測(cè)平臺(tái)承接細(xì)胞周期檢測(cè)、增殖檢測(cè)、凋亡檢測(cè)等流式實(shí)驗(yàn)外包，擁有上千例流式實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)快周期短，是您科研路上的鐵哥們兒哦！

細(xì)胞凋亡檢測(cè)

凋亡細(xì)胞在形態(tài)上可見(jiàn)與周?chē)?xì)胞脫離接觸，細(xì)胞變圓，細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、細(xì)胞核固縮破裂呈團(tuán)塊狀或新月?tīng)罘植肌?nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進(jìn)一步融合將細(xì)胞分成多個(gè)完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬細(xì)胞吞噬消化。在凋亡過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)容物并不釋放到細(xì)胞外，不會(huì)影響其它細(xì)胞，因而不引起炎癥反應(yīng)。

OK，話不多說(shuō)我們來(lái)看看有哪些注意事項(xiàng)吧。

1、誘導(dǎo)培養(yǎng)檢測(cè)凋亡的細(xì)胞的時(shí)間要準(zhǔn)確

1、旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前需要短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體用至離心管底，盡量避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落出來(lái)。

2、Annexin V-FITC和Propidium iodide是光敏物質(zhì)，流式檢測(cè)保存與操作時(shí)請(qǐng)注意避光。

3、Propidium iodide(PI)能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，所以實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要注意保護(hù)好自己裸露在外的皮膚，戴好手套。

細(xì)胞凋亡檢測(cè)注意事項(xiàng)

4、在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5、PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首先進(jìn)行Annexin V-FITC熱色，上機(jī)前5分鐘再加入PI熱色。

6、整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作。

7、.熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí)，由于熒光易碎滅，觀察時(shí)要盡量快。反應(yīng)完畢后盡快檢測(cè)，因?yàn)榧?xì)細(xì)胞凋廣檢測(cè)是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過(guò)程，反應(yīng)1小時(shí)后熒光強(qiáng)度就開(kāi)始衰變。

8、成功的檢測(cè)凋亡受以下幾種因素的影響，如細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞膜上PS的密度、發(fā)生凋亡時(shí)PS翻轉(zhuǎn)的比例、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法、所用試劑、誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間等，把這些影響因素進(jìn)行優(yōu)化對(duì)實(shí)驗(yàn)成功是非堂必要的。
那么用流式進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)我們就講完了，科研很累但是做對(duì)了結(jié)果很美，還有其他的主義是系那個(gè)需要補(bǔ)充·或者有不懂問(wèn)題的可以給客服留言技術(shù)會(huì)及時(shí)回復(fù)您的，如果您有細(xì)胞凋亡檢測(cè)或生物實(shí)驗(yàn)外包相關(guān)的實(shí)驗(yàn)需求普拉特澤永遠(yuǎn)在線哦~

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