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非酒精性脂肪肝造模詳細(xì)步驟【非酒精性脂肪肝造模外包】

2022-10-14 15:08:24

來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)

        非酒精性脂肪肝造模實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享,非酒精性脂肪肝在現(xiàn)在人群中發(fā)病年率越來(lái)越高,動(dòng)物模型研究非酒精性脂肪肝的發(fā)病原理與機(jī)制是藥物研究的重要手段。普拉特澤生物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)專業(yè)提供各類脂肪肝造模外包服務(wù),本文就來(lái)跟大家一起學(xué)習(xí),非酒精性脂肪肝造模的詳細(xì)操作步驟~

        根據(jù)脂肪肝的不同病因,有多重造模方式,如高脂飼料喂養(yǎng)、酒精損害、毒物損傷、復(fù)合因素等方法,本文分享的是高脂飼料喂養(yǎng)進(jìn)行非酒精性脂肪肝造模的方法。

        1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

        實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備: SD 大鼠40,體重200~~220g,清潔級(jí);豬油、雞蛋黃自備;高脂造模飼料;普通飼料

        2、實(shí)驗(yàn)方法

        (1)動(dòng)物分組及處理 SD 大鼠40只,隨機(jī)分為兩組各20只。除正常對(duì)照組外,全部給予高脂飲食復(fù)制非酒精性脂肪性肝炎模型。

        (2)高脂飲食由普通飼料加15%豬汕,8%蛋黃粉,2%膽固醇組成,觀察動(dòng)物的體重、飲食、毛發(fā)、活動(dòng)情況、肝/體重比等。。

        (3)在造模第4周、8周、18 周分別處死模型組動(dòng)物各2只,觀察其病理模型形成情況。

        (4)18周末將大鼠用2%戊巴比妥鈉(45mg/kg)腹腔注射,麻醉后下腔靜脈取血,將血標(biāo)本離心后用于血脂檢測(cè);取肝左葉,用10%中性福爾馬林溶液固定

        (5)石惜包埋切片,作肝細(xì)織病理學(xué)觀察。

        3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        (1)動(dòng)物的一般情況

        實(shí)驗(yàn)期間正常組動(dòng)物精力充沛,靈活好動(dòng),飲食正常,皮毛整潔,體重緩慢增加;

        模型組飲食量大,嗜睡,毛色偏黃,個(gè)體較大,體重增長(zhǎng)較正常組較快,至8周時(shí),模型組各動(dòng)物體重較正常組平均重21%,有不同程度的精神萎靡,活動(dòng)減少,皮毛凌亂。

        (2)體重和肝指數(shù)

        兩組大鼠體重和肝指數(shù),模型組較正常組體重及肝指數(shù)均顯著增加

        (3)血脂

        檢測(cè)兩組大鼠的血脂,模型組與正常組相比,有顯著的差異性。

        (4)肝臟病理學(xué)變化

        肉眼觀察:肉眼觀察 正常組大鼠肝臟形態(tài)正常,18周時(shí)無(wú)一例出現(xiàn)異常。模型組大鼠造模4周起肝臟外形稍飽滿圓鐘,質(zhì)地較脆,色紅;8~12 周肝臟體積增大,包膜緊張,色澤灰黃,切面油膩;18 周時(shí),模型組動(dòng)物肝臟明顯增大,包膜緊張,邊緣較鈍,質(zhì)地略軟,色變黃,表面呈花斑狀,觸之似泥塊并有油膩感,部分大鼠肝臟有黃白魚(yú)的局灶性脂肪沉積。

        光鏡觀察:

        正常組肝小結(jié)構(gòu)正常,肝細(xì)胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列。無(wú)肝細(xì)胞腫脹及脂肪變性。模型組肝組織HE染色顯示:造模4周后大鼠肝臟即有輕微的肝細(xì)胞脂肪變性,標(biāo)本還出現(xiàn)匯管區(qū)及小葉內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和散在的點(diǎn)狀壞死;造模8周大鼠多呈中度脂肪變,且炎癥活動(dòng)積分明顯高于造模4~8 周大鼠,可見(jiàn)到小葉內(nèi)炎癥,炎癥細(xì)胞主要以單核細(xì)胞為主,炎癥程度明顯加重;造模 18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪變,脂滴分布密度通大,可見(jiàn)大部分旺細(xì)胞漿含大脂滴,部分脂滴形成大空泡。將細(xì)胞核擠壓至一邊,目以中央靜脈周圍為其:肝小葉結(jié)構(gòu)破壞,肝細(xì)胞排列不規(guī)救,并伴大量肝細(xì)胞腫脹,部分呈氣球樣變,匯管區(qū)炎癥尚輕微。

        好啦,那關(guān)于非酒精性脂肪肝動(dòng)物造模的注意事項(xiàng)咱們就講到這里啦,有不懂的操作歡迎隨時(shí)留言給我們,如果您也正在準(zhǔn)備進(jìn)行非酒精性脂肪肝動(dòng)物造模實(shí)驗(yàn)或有動(dòng)物造模外包的需求,歡迎選擇為真實(shí)實(shí)驗(yàn)而生的普拉特澤生物~

——關(guān)于我們——

普拉特澤自建3000平米的GMP級(jí)實(shí)驗(yàn)室
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