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糖尿病動物造模實驗步驟由普拉特澤生物技術為大家總結(jié)分享，糖尿病是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用而導致的慢性全身性疾病，糖尿病動物模型是研究糖尿病發(fā)病機制及治療藥物的關鍵手段。普拉特澤生物動物實驗平臺長期承接糖尿病動物模型的外包代做，建立糖尿病模型上百例，總結(jié)積累了很多的實驗操作經(jīng)驗與方法，本文就把糖尿病動物造模的方法分享給大家~

之前的糖尿病模型的實驗介紹中，我們講到了糖尿病動物模型的構(gòu)造有手術切除胰腺誘導、化學藥物誘導、自發(fā)性糖尿病、飲食誘導、基因修飾等方法來誘導糖尿病動物模型，本文給大家詳細講解比較常見的手術切除胰腺誘導和藥物誘導糖尿病動物模型兩種方法。

一、手術切除胰腺誘導糖尿病動物模型步驟

胰腺切除法是最早的糖尿病動物模型復制方法(制成一型糖尿病模型)。一般選用較大的實驗動物，如狗和家兔等，其次用大鼠(小鼠不適用)。

其步驟是，切除實驗動物全部或大部分胰腺，但保存胰十二指腸動脈吻合弓。如果實驗動物連續(xù)兩天血糖值超過11.1 mmol/L或者葡萄糖耐量試驗120 min時的血糖值仍未恢復到注射前水平則認為DM造模成功。

二、化學藥物誘導糖尿病動物模型步驟

運用化學藥物損傷胰島B細胞導致胰島素缺乏而引起糖尿病(一型糖尿病)，常用的藥物有四氧嘧啶(Alloxan)和鏈脲佐菌素。

1、STZ誘發(fā)的糖尿病動物模型(目前使用最為廣泛)

造模方法：注射前用0.05mol/L檸檬酸(pH4.5)配成2%的STZ溶液，新鮮使用。大鼠糖尿病STZ的劑量為40~75mg/kg(靜脈注射或腹腔注射，一定要注意回抽，嚴格禁止注入胃腸道)。小鼠對此藥敏感性較差，常用量為100~200mg/kg(靜脈注射或腹腔注射)。

評判標準：注射STZ溶液2天或者3天后，連續(xù)3天采用尿糖檢測試紙檢測尿糖水平，血糖水平采用葡萄糖氧化酶法檢測即可，若尿糖≥3，血糖持續(xù)升高，說明注射是沒問題。一周后大鼠出現(xiàn)三多一少癥狀，再次檢測，若尿糖≥3，血糖≥16.67mmol/L，說明造模成功。

2、四氧嘧啶(Alloxan)誘發(fā)糖尿病動物模型操作步驟

四氧嘧啶(Alloxan)是一種特異的胰島細胞毒劑，可以通過超氧自由基破壞胰島B細胞，使得胰島素分泌減少，它常用于制備一型糖尿病動物模型。

造模方法：一般配成1%-3%濃度即可使用。給藥劑量依動物及給藥途徑不同而異(均需臨用前配置)，大鼠150-200 mg/kg(ip)，40-60 mg/kg(iv);小鼠200 mg/kg(ip)，85-100 mg/kg (iv)。

評判標準：用藥后2~3小時后出現(xiàn)初期高血糖，持續(xù)6~12小時后進入低血糖期，動物出現(xiàn)痙攣。注射后18h，大鼠即可出現(xiàn)高血糖、多尿、多飲等典型癥狀，血糖會升高至16.67mmol/以上，隨著時間的推移，2周左右即可形成一型糖尿病模型。

三、食物+化學誘導模型步驟（高脂高糖加鏈脲佐菌素誘導川型糖尿病模型）

這種模型就是先給大鼠喂高脂高糖飼料，以誘發(fā)胰島素抵抗，隨后再腹腔注射少量的鏈脲佐床素(STZ)使得部分胰島細胞遭到破壞，從而引起血糖的升高。

8周齡的SD大鼠高熱量飼喂2個月后，一次性腹腔注射15-30ma/ka劑量2%STZ溶液，可建立外周胰島素抵抗和胰島功能輕度受損的糖尿病動物模型，與人Ⅱ型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過程相似，且STZ用量小，減少了對其他組織的損害。

高糖高脂飼料配方：66.5%普通飼料，20%蔗糖，10%豬油，2.5%膽固醇，1%膽酸鹽。

評判標準：造模3天后測定大鼠尾靜脈血糖，隨機血糖>16.7mmol/L視為建模成功。

好啦，那糖尿病動物模型的造模步驟就講完啦，雖然造模方法過程大同小異，但是操作人員的技術與經(jīng)驗也起到了非常重要的作用，尤其是手術和化學藥物誘導糖尿病動物模型的方法，是否能構(gòu)建合適的疾病模型和降低實驗動物的死亡率與實驗人員的手法和藥物濃度的劑量都息息相關。所以如果您有糖尿病動物模型外包的需求的話，歡迎選擇普拉特澤生物，隨時給客服留言~

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