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        肝纖維化動物造模操作步驟由普拉特澤生物動物技術(shù)人員為大家總結(jié)分享。肝纖維化是肝臟受到損傷后細(xì)胞外基質(zhì)合成、降解與沉積不平衡的一種修復(fù)反應(yīng)，肝纖維化動物模型的建立可以更好地幫助研究者了解分析肝纖維化的發(fā)病機(jī)制與研發(fā)臨床治療方法。普拉特澤生物動物實(shí)驗(yàn)平臺長期提供肝纖維化動物模型外包服務(wù)，專業(yè)認(rèn)真。

        上期我們分享了肝纖維化動物造模常用的四種方法，CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型、二甲基亞硝胺誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型、膽汁淤積誘導(dǎo)肝纖維化模型、營養(yǎng)型等其他肝纖維化模型，本文來詳細(xì)分享用CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的實(shí)驗(yàn)步驟。

        一、CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型實(shí)驗(yàn)步驟

        CCl4誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的造模機(jī)制：CCl4為一種選擇性肝毒性藥物，其進(jìn)入機(jī)體后在肝內(nèi)活化成自由基如三氯甲基自由基(CCl3)，后者可直接損傷質(zhì)膜，啟動脂質(zhì)過氧化作用，破壞肝細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)等，造成肝細(xì)胞變性壞死和肝纖維化的形成。造模方法：大鼠：CCl4與橄欖油1:1比例混合均勻。小鼠：CCl4與橄欖油1:7比例混合均勻大鼠皮下、腹腔或口服給予配制好的造模劑，劑量為1-2ml/kg，每周2次，保證給藥時間間隔一致，持續(xù)6-8周即可出現(xiàn)肝臟的纖維化癥狀。

        1、實(shí)驗(yàn)動物、材料的準(zhǔn)備

        實(shí)驗(yàn)動物：

        8周齡，體重為230±20g左右的SD大鼠

        8周齡，體重為25±2g左右的C57Bl/6小鼠

        實(shí)驗(yàn)材料：CCl4、橄欖油（植物油）、注射器

        2、實(shí)驗(yàn)操作

        （1）試劑配制：大鼠：CCl4與橄欖油1:1比例混合均勻；小鼠：CCl4與橄欖油1:7比例混合均勻

        （2）  CCl4誘導(dǎo)大鼠皮下、腹腔或口服給予配制好的造模劑，劑量為1-2ml/kg，每周2次，保證給藥時間間隔一致，持續(xù)6-8周即可出現(xiàn)肝臟的纖維化癥狀。

        （3）觀察實(shí)驗(yàn)動物的病理變化位置：中心葉或門靜脈區(qū)。

        （4）CCl4易揮發(fā)，最好配置當(dāng)天使用。在進(jìn)行正式試驗(yàn)之前最好進(jìn)行一次預(yù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證所選的動物及造模時間是否符合預(yù)期。

        二、二甲基亞硝胺誘（DMN）導(dǎo)肝纖維化模型實(shí)驗(yàn)步驟

        二甲基亞硝胺誘導(dǎo)肝纖維化模型造模機(jī)制：NDMA是一種致癌物，大劑量使用，NDMA進(jìn)入肝細(xì)胞經(jīng)微粒體代謝生成乙醛，后者引起肝細(xì)胞損害，肝壞死和肝纖維化。

        1、實(shí)驗(yàn)動物、材料準(zhǔn)備

        實(shí)驗(yàn)動物：8周齡，SD大鼠，體重230±20g左右

        實(shí)驗(yàn)材料：DMN，生理鹽水

        2、實(shí)驗(yàn)操作

        （1）試劑配制：稱量一定量的DNN，使用生理鹽水按照10mg/kg的劑量進(jìn)行配制。

        （2）3次/周腹腔注射，連續(xù)給藥大于4周，檢測相關(guān)肝臟損傷和纖維化指標(biāo)以便判斷纖維化是否發(fā)生。

        （3）觀察實(shí)驗(yàn)動物病理變化位置：匯管區(qū)纖維化（中央門靜脈區(qū)）

        （4）實(shí)際的操作中我們要注意：給藥方式理論上是每周給藥三次，但要根據(jù)實(shí)際動物狀態(tài)，調(diào)整給藥的頻率，適當(dāng)?shù)臏p少或者增加，若減少頻率需增加給藥時間，增加給藥頻率可適當(dāng)減少給藥時間，但一般都要持續(xù)4周。

        好啦，那關(guān)于肝纖維化動物模型的CCl4和二甲基亞硝胺誘導(dǎo)肝纖維化動物模型實(shí)驗(yàn)步驟就講完啦，如果您對實(shí)驗(yàn)步驟有任何建議或疑問可以隨時留言給客服，技術(shù)會及時給到解答的，如果您有肝纖維化動物造模實(shí)驗(yàn)外包的需求，歡迎選擇普拉特澤生物~