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ELISA原理、操作以及注意事項

2024-03-26 17:21:23

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

  普拉特澤生物繼續(xù)跟大家一起學(xué)習(xí)新的實驗——ELISA實驗。在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)已成為一種不可或缺的技術(shù)手段,普拉特澤生物表達檢測平臺可承接各種表達檢測外包服務(wù),包括檢測ELISA、Western Blot、DNA甲基化等實驗外包服務(wù)。

本文將為科研小白詳細解析ELISA的原理、操作步驟以及注意事項,讓小白們輕松掌握這一實驗技能。

(一)ELISA原理簡介

ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫分析技術(shù)。其基本原理是利用酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測樣本中的相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合,通過酶催化底物顯色反應(yīng)來檢測待測物質(zhì)的含量。

ELISA

二、ELISA操作步驟

[1]樣本處理:根據(jù)實驗要求,對樣本進行適當(dāng)?shù)南♂尰蛱幚?,以便后續(xù)操作。

[2]抗原或抗體包被:將抗原或抗體包被在固相載體(如微孔板)上,形成固相抗原或抗體。

[3]加入待測樣本:將待測樣本加入包被好的微孔中,與固相抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。

[4]加入酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體或抗原,與待測樣本中的抗原或抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)復(fù)合物。

[5]洗滌:去除未結(jié)合的干擾物質(zhì),以提高實驗的準(zhǔn)確性。

[6]顯色反應(yīng):加入底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),形成有色產(chǎn)物。

[7]結(jié)果判定:通過測量有色產(chǎn)物的吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,計算待測樣本中抗原或抗體的含量。

ELISA實驗流程


三、注意事項

Ⅰ.實驗環(huán)境:保持實驗室環(huán)境清潔,避免污染。實驗過程中要佩戴手套,避免直接接觸樣本和試劑。

Ⅱ.試劑保存:試劑應(yīng)保存在干燥、陰涼、避光的環(huán)境中,避免受潮和高溫。

Ⅲ.樣本處理:樣本處理過程中要注意避免交叉污染,確保樣本的準(zhǔn)確性和可靠性。

Ⅳ.實驗操作:實驗過程中要嚴格按照操作步驟進行,避免誤操作導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。

Ⅴ.結(jié)果解讀:實驗結(jié)果應(yīng)結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線進行解讀,避免主觀臆斷導(dǎo)致誤判。

ELISA樣本檢測結(jié)果圖

四、總結(jié)

通過本文的詳細介紹,相信您對ELISA的原理、操作步驟以及注意事項有了更深入的了解。在實際操作過程中,要注意實驗環(huán)境的清潔、試劑的保存、樣本的處理以及實驗操作的準(zhǔn)確性,以確保實驗結(jié)果的可靠性。希望本文能為您在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的實驗工作提供有益的幫助。

好,ELISA原理、操作以及注意事項就介紹到這里啦~

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