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怎么區(qū)分IF/IHC/ICC?分別是什么意思

2022-02-23 11:10:51

來源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺(tái)

     對于這IF(免疫熒光)/IHC(免疫組化)/ICC(免疫細(xì)胞化學(xué))三個(gè)應(yīng)用,有一個(gè)部分大家肯定不會(huì)混的就是“免疫”,因?yàn)檫@三個(gè)應(yīng)用都涉及到使用抗體。首先,我們先從命名出發(fā)

       Immuno-指的是免疫技術(shù)(例如,抗體和抗原的結(jié)合)

       Histo-指的是組織(細(xì)胞以及它周圍的細(xì)胞外基質(zhì))

       Cyto-指的是細(xì)胞(不包含細(xì)胞外的基質(zhì))

       Chemistry-在這里指的是化學(xué)檢測方法(例如,顏色的變化)

       Fluorescence-對被激發(fā)的熒光團(tuán)的檢測

 

     按檢測技術(shù)來分,IHC和ICC其實(shí)同屬一大類,都屬與將免疫沉淀技術(shù)與化學(xué)發(fā)光技術(shù)的結(jié)合,只是檢測對象一個(gè)是組織,一個(gè)是細(xì)胞。從實(shí)驗(yàn)原理及流程都大致相同,只有前期對樣本的處理有不同。IHC用的組織樣本一般會(huì)做成組織切片,ICC用的細(xì)胞樣本會(huì)做成細(xì)胞爬片。利用的指示劑都是化學(xué)顯色劑,需要的是酶促發(fā)光。而IF則屬于免疫熒光檢測了,是免疫沉淀技術(shù)與熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合的檢測技術(shù),利用的是熒光基團(tuán)來指示檢測結(jié)果??康氖莾x器發(fā)送激發(fā)光來顯色觀察。IF的樣本也是分為細(xì)胞和組織,所以更規(guī)范來說,我覺得應(yīng)該將應(yīng)用于組織的免疫熒光(IF)稱為IHF和應(yīng)用與細(xì)胞的免疫熒光技術(shù)(IF)稱為ICF。它們分別意為(免疫組織熒光)Immuno histo fluorescence與Immuno cyto fluorescence(免疫細(xì)胞熒光),目前已經(jīng)有些學(xué)者在使用了,普及化也只是時(shí)間的問題。畢竟從專業(yè)角度說,我通常會(huì)從一個(gè)命名去了解內(nèi)容本身,命名的原則也源于此。以下通過幾幅圖片來具體形象的區(qū)分別一下:

   

                                                   

      IHC染色結(jié)果     

  ICC染色結(jié)果


           

      IF實(shí)驗(yàn)結(jié)果


此外他們的區(qū)分還在于:

     1.化學(xué)方法染色和熒光激發(fā)染色,如果是酶促的,就是免疫化學(xué)(IHC/ICC),如果是熒光的,就是免疫熒光(IF)。

  2.標(biāo)本制作:免疫熒光一般用冰凍切片,減少雜質(zhì)干擾;而酶免疫組化一般用石蠟切片冰凍切片均可以。


  3.實(shí)驗(yàn)步驟:
免疫熒光染色步驟簡單,而酶免疫組化方法較為復(fù)雜,多了DAB顯色過程。
 
  4.染色后的標(biāo)本保存:免疫熒光染色后的標(biāo)本一般短時(shí)間拍照,時(shí)間長了熒光衰退;而酶免疫組化染色標(biāo)本可以長期保存。

 
  5.
免疫組化和免疫熒光結(jié)果除了知道蛋白是在細(xì)胞漿還是細(xì)胞膜表達(dá)高些,還可以用做半定量分析。

 
  6.
免疫熒光得到的圖片是彩色的,漂亮些,可以發(fā)高檔次文章。


     時(shí)間有限,此次就給大家總結(jié)到此。相信大家和我初次看到他們一樣,想要了解更多信息,想對他們有一個(gè)清晰的認(rèn)知。我一直覺得探索是永無止境的,對知識(shí)的饑餓感讓我們一直在不斷的前進(jìn),想要了解更多關(guān)于他們的秘密嗎,歡迎來我們普拉特澤春風(fēng)學(xué)院學(xué)習(xí)哦,線上學(xué)習(xí),線下實(shí)操,做你們科研的擺渡人!

                
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