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甲苯胺藍(lán)染色步驟

2025-02-12 17:32:25

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)

    甲苯胺藍(lán)染色步驟由普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)為大家總結(jié)分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長期穩(wěn)定的番紅固綠染色外包實(shí)驗(yàn)服務(wù)

本文給大家分享咱們技術(shù)長期總結(jié)下來的動(dòng)物組織番紅固綠組織染色實(shí)驗(yàn)步驟:

甲苯胺藍(lán)染色在組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)中可是個(gè)重頭戲,它能幫助我們清晰地觀察到細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和成分。

一、準(zhǔn)備階段?

⒈獲取待染色的組織標(biāo)本,這可以是活體組織或已經(jīng)固定的組織切片。

⒉將組織標(biāo)本進(jìn)行固定,常用的固定劑有10%緩沖福爾馬林溶液或4%的緩沖乙醛溶液。固定時(shí)間根據(jù)組織的大小和類型而定,一般為數(shù)小時(shí)至過夜。

二、脫水與滲透?

Step1:將固定后的組織標(biāo)本進(jìn)行脫水處理,常用的脫水劑為乙醇。脫水過程中,逐漸將組織標(biāo)本從低濃度的乙醇轉(zhuǎn)移到高濃度的乙醇中,直至完全脫水。

Step2:將脫水后的組織標(biāo)本進(jìn)行滲透處理,常用的滲透劑為二甲苯。將組織標(biāo)本逐漸轉(zhuǎn)移到二甲苯中,確保組織完全滲透。

?包埋與切片?

Step3:將滲透后的組織標(biāo)本進(jìn)行包埋處理,常用的包埋劑為石蠟。

Step4:將包埋后的組織標(biāo)本進(jìn)行切片,切片厚度一般為4~6微米。切片工具常用的是組織切片機(jī)。

1)脫蠟至水?

Step5:將切片放入二甲苯中浸泡脫蠟,一般需要經(jīng)過三個(gè)二甲苯缸,每個(gè)缸浸泡5~10分鐘。

Step6:使用無水乙醇、95%乙醇和75%乙醇依次浸泡切片,每個(gè)濃度浸泡1分鐘左右,目的是去除切片上的二甲苯,并使切片逐漸水化。

用自來水沖洗切片數(shù)秒,洗去殘留的乙醇。

2?)染色?

Step7:將切片放入甲苯胺藍(lán)染色液中,染色時(shí)間通常為20~30分鐘。具體時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和切片情況適當(dāng)調(diào)整。

Step8:在染色過程中,要確保切片完全浸泡在染色液中,并輕輕搖動(dòng)染色缸,使染色更加均勻。


?3)分化?

Step9:染色完成后,使用95%乙醇或1%鹽酸酒精進(jìn)行分化,去除多余的染料。分化過程中要在顯微鏡下觀察切片,控制分化效果。分化時(shí)間不宜過長,避免過度分化導(dǎo)致染色過淺。

?脫水透明

Step10:將分化后的切片再次放入無水乙醇中脫水,確保切片上的水分被完全去除。

Step11:將脫水后的切片放入二甲苯中進(jìn)行透明處理,一般需要經(jīng)過三個(gè)二甲苯缸,每個(gè)缸浸泡1~2分鐘。透明過程中要確保切片完全浸泡在二甲苯中,使切片變得透明清晰。

4?)封片與觀察?

Step12:在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠,然后蓋上蓋玻片進(jìn)行封固。封片時(shí)要避免產(chǎn)生氣泡,以免影響觀察效果。

Step13:封片完成后,將切片放在顯微鏡下觀察。在顯微鏡下,你可以清晰地看到細(xì)胞核被染成藍(lán)色,肥大細(xì)胞等特定細(xì)胞結(jié)構(gòu)也呈現(xiàn)出獨(dú)特的染色效果。


怎么樣?甲苯胺藍(lán)的染色步驟是不是既詳細(xì)又清晰呢?只要按照上述步驟操作,你就能輕松掌握這項(xiàng)技術(shù)啦:18570028002(甲苯胺藍(lán)的染色實(shí)驗(yàn)指導(dǎo))
記得在實(shí)驗(yàn)過程中要注意安全哦!

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