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   流式檢測細(xì)胞周期的注意事項由普拉特澤生物根據(jù)承接的幾千例流式檢測細(xì)胞周期實驗和各種實驗過程中的技術(shù)咨詢總結(jié)而來，普拉特澤生物專注提供線下生物實驗研究，積累了大量經(jīng)驗，為廣大科研工作者提流式檢測細(xì)胞周期等各類生物學(xué)實驗外包。

   那么今天的流式檢測細(xì)胞周期注意事項我們分為兩個方面為大家解讀：

   一、流式檢測細(xì)胞樣本的制備的注意事項

   1、根據(jù)不同的檢測細(xì)胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。

   2、培養(yǎng)細(xì)胞時，以對數(shù)期處理為宜，避免細(xì)胞量過少導(dǎo)致收集細(xì)胞量不足或者細(xì)胞量過多導(dǎo)致細(xì)胞開始大量死亡造成的實驗誤差。

   2、流式檢測細(xì)胞周期上機(jī)檢測所需收集細(xì)胞量較多，收集細(xì)胞時盡量多收集一些

   3、流式檢測對細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作輕緩，避免過多地?fù)p傷、弄破細(xì)胞。

   4、本實驗對細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動作輕緩，避免過多地?fù)p傷細(xì)胞。

   5、細(xì)胞周期待測細(xì)胞盡量要獲得單個細(xì)胞，避免DNA的降解。

   6、樣本最關(guān)鍵的就是減少碎片(EDTA/不可過度吹打/離心rpm)。PI既能與DNA結(jié)合，又能與RNA結(jié)合，所以要用RNase降解。PI質(zhì)量及RNase所加量很重要，建議用商品化試劑。

   7、污染脫氧核糖核酸酶會降解DNA，故玻璃器皿和試劑要干凈滅菌。

   8、染液等物質(zhì)有一定毒性，注意防護(hù)。

   二、流式檢測時的注意事項：

   1、固定時必須預(yù)冷PBS重懸打入無水乙醇中，二者順序不可顛倒。

   2、固定后細(xì)胞雖然可以保存較長時間后再上機(jī)檢測，為避免不可控因素影響最好盡早上機(jī)檢測。

   3、進(jìn)樣速度：一般檢測細(xì)胞濃度調(diào)整為2*10^5到2*10^6/mL，進(jìn)樣速度為低速。若峰形較寬，可能就是進(jìn)樣速度太快。

   4、儀器質(zhì)控定期做，盡可能排除因機(jī)器設(shè)置引起的峰形加寬。排除粘連細(xì)胞(FL2-A/FL2-W)。

   5、通過電壓脈沖信號的寬度和面積區(qū)別實體組織標(biāo)本中的粘連細(xì)胞群體，最大程度的減少粘連細(xì)胞帶來的假陽性結(jié)果。
   到這里，用流式檢測細(xì)胞周期操作過程中我們要注意的問題就講完了，學(xué)習(xí)流式檢測細(xì)胞周期實驗步驟可點(diǎn)擊此處跳轉(zhuǎn)，如果朋友們還有新的問題或要補(bǔ)充的注意事項可以隨時聯(lián)系我們的客服小姐姐補(bǔ)充交流學(xué)習(xí)哦。當(dāng)然如果您有細(xì)胞周期檢測等實驗外包的需求，普拉特澤隨時為您服務(wù)。