97久久久久久久精-久久 精品视频 99-欧美日韩在线黄色-亚洲国产精品五月天久久久-最新中文文字幕内射-国内精品福利自拍在线视频-91麻豆国产高清产精品-懂色av一区二区三区性色av-亚洲一区二区 偷拍,久久久精品人妻一区二区三区,久久6热视频在线观看,日韩成人特级黄片

        考馬斯亮藍染色法介紹由普拉特澤生物分享，在蛋白質(zhì)染色方法中，目前以考馬斯亮藍染色最為常用，因為它既克服了氨基黑染色靈敏度不高的限制，又比銀染簡便易操作。普拉特澤的生物病理實驗平臺長期為廣大生物醫(yī)學人員提供考馬斯亮藍染色實驗外包服務(wù)。

        1、考馬斯亮藍染色介紹

        考馬斯亮藍染色是用考馬斯亮藍進行蛋白質(zhì)染色的方法?？捡R斯亮藍是一種陰離子染料， 常用考馬斯亮藍G250和R250?？捡R斯亮藍 G250在游離狀態(tài)下呈紅色，當它與蛋白質(zhì) 通過疏水結(jié)合后變?yōu)樗{色，蛋白質(zhì)-色素結(jié) 合物在595 nm波長下有最大光吸收。其光 吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比，因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。

        2、考馬斯亮藍染色的歷史

        考馬斯亮藍染色最早由 Fazekas 等在 1963 年用于醋酸纖維素膜電泳，并認為同樣可用于紙電泳，瓊脂糖電泳和淀粉凝膠電泳。1965 年 Meyer 等將此方法應(yīng)用于聚丙烯酰胺凝膠電泳。

        3、考馬斯亮藍染色的靈敏度

        考馬斯亮藍染色可以達到 0.2~0.5 μg（200~500 ng），最低可檢出 0.1 μg蛋白；銀染的靈

        敏度比考染高將近 100 倍，最低可以檢出 2 ng 蛋白，通過考染條帶的深淺粗細，可以大致判斷該條帶有多少蛋白。

        4、考馬斯亮藍染料的種類

        考馬斯亮藍分為 R-150、R-250、R-350、G-250 等。其中 R-350 最為靈敏，R 為紅藍色，G為綠藍色。R-250 即三苯基甲烷，每個分子含有兩個 SO3H 基團，偏酸性，與氨基黑一樣也是結(jié)合到蛋白質(zhì)的堿性基團上。G-250 即二甲花青亮藍，是一種甲基取代的三苯基甲烷。

        推薦一種考染的方法

        ⑴ 電泳后的凝膠立即浸泡在固定液（500 ml 乙醇，100 ml 冰醋酸，400 ml 蒸餾水）中

        至少 30 min，如有必要可在固定液中浸泡過夜；

        ⑵ 將固定后的凝膠在熱的染色液（0.29 g 考馬斯亮藍溶解在 250 ml 脫色液中，在使用前

        邊攪拌邊加熱至 60℃）中浸泡 10 min，然后用蒸餾水將凝膠淋洗一次；

        ⑶ 多次變換脫色液（250 ml 乙醇，80 ml 冰醋酸，加蒸餾水至 1 L），直至凝膠背景脫凈

        為止，為加快脫色，可略加溫度；以上各步最好用振蕩器（搖床）震蕩染色皿。

        ⑷ 為了防止凝膠干燥后的龜裂，脫去背景色的凝膠在保存液（25 ml 87% 甘油加 225 ml 脫

        色液）中浸泡 30 min。然后將凝膠放在玻璃板上，再用保存液浸濕玻璃紙包住凝膠在室溫下晾干。

        如果您也準備考馬斯亮藍染色的考馬斯亮藍染色的方法不是唯一的，你可以參考幾種之后總結(jié)一個適合自己的方案出來，有什么不懂得歡迎隨時給普拉特澤留言~