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實驗介紹
【應用簡介】
免疫表型分析可以作為鑒別各種白血病和淋巴瘤的實驗手段，輔助臨床評估療效和預后。不是所有的細胞都能通過免疫表型來判定，只有有特異表型標志的細胞才能通過表型來判斷。
【免疫表型】
免疫表型是通常所說的白細胞分化標志，即CD加上數字，現(xiàn)在已經發(fā)現(xiàn)300多種白細胞分化標志。因為細胞不同，所以每個細胞的標志也會不同，就像不同的人有不同的面孔一樣。不同的免疫細胞表面有大量的抗原，可以作為不同分化階段免疫細胞的表面標志物。
淋巴細胞亞群分析是檢測細胞免疫和體液免疫功能的重要指標，它總體反應機體當前的免疫免疫功能、狀態(tài)和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾病，如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應性疾病等，分析發(fā)病機制，觀察療效及檢測預后有重要意義。
【實驗方法】
1、取20ul單克隆抗體與100μl抗凝血，共同混合置室溫20 min；
2、加溶血素1500μI，置室溫避光15 min，2500 r/min離心5 min；
3、棄上清，加1500μI PBS，混勻，2500 r/min離心5 min；
4、同上操作1次，上儀器檢測：以CD45-PerCP/SSC設門，觀察每群細胞免疫表型。
案例展示
圖 1. 淋巴細胞亞群的免疫表型
技術總結
1、標本最好用EDTA抗凝，其次用肝素；
2、標本要新鮮采集，不能發(fā)生凝血；
3、制備細胞懸液時，使用標準溶血劑以使紅細胞充分溶解；
4、標記后的細胞應盡快上機檢測，最遲不能超過72h。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 凍存細胞 | 1.取對數生長期的細胞，消化離心收集細胞，加入凍存液吹打混勻，裝入凍存管，標明細胞名稱/細胞代數，凍存細胞數量在1-5*106個/ml。 2.項目啟動后細胞復蘇，復蘇后3天反饋細胞狀態(tài)，3-5天反饋細胞污染情況，5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息（名稱、培養(yǎng)基和其他培養(yǎng)條件等，如經過特別處理需告知并提供必要的信息） | 液氮 | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標記，且標記清晰可識 |
| 復蘇后細胞 | 1.使用T25培養(yǎng)瓶運輸。細胞匯合度達到60%以上，裝滿培養(yǎng)液，只留紐扣大小的氣泡，瓶口用封口膜封好，標明細胞名稱/細胞代數/接種時間/培養(yǎng)基類型，瓶子固定運輸。 2.收到細胞后3天反饋細胞狀態(tài)，3-5天反饋細胞污染情況，5-7天反饋支原體污染情況。 3. 細胞詳細信息（名稱、培養(yǎng)基和其他培養(yǎng)條件等，如經過特別處理需告知并提供必要的信息） | 常溫 | 常溫 | |
| 質粒 | 1.純度高，無內毒素，無蛋白質，基因組DNA/RNA污染，質粒A260:A280的比值在1.8-2.0之間 2.濃度不低于0.5μg/μl，總量大于100μg，無內毒素處理 3. 載體詳細信息，包括名稱、大小、抗性、熒光標記 | -20℃ | 冰袋 | |
| 病毒 | 1.慢病毒：滴度不低于1*108TU/ml，體積約200μl，標明制備時間，且沒有反復凍融 2.腺病毒：滴度不低于1*109PFU/ml，體積約200μl，標明制備時間，且沒有反復凍融 3.明確是否表達熒光標簽蛋白及其種類，最好需要提供病毒載體圖譜； | -80℃ | 干冰 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
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