Treg/Tfh/Tfr/iTR-35檢測(cè)
Treg/Tfh/Tfr/iTR-35檢測(cè)，我們常用的檢測(cè)指標(biāo)：CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。
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實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對(duì)含量，從而得到細(xì)胞群的相對(duì)比值。
調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）是免疫系統(tǒng)中的必需細(xì)胞，可抑制其他細(xì)胞的免疫反應(yīng)，旨在限制過(guò)度反應(yīng)并防止自身免疫。Tregs以CD4，CD25和Foxp3的表達(dá)為特征，而缺少CD127。CD4 + Foxp3 +調(diào)節(jié)性T細(xì)胞已被稱為“天然存在”的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，以將其與體外產(chǎn)生的“抑制性” T細(xì)胞群體區(qū)分開(kāi)。
輔助性T細(xì)胞(Follicular helper T cells,Tfh細(xì)胞)為生發(fā)中心產(chǎn)生親和力成熟的B細(xì)胞提供了必不可少的幫助。通過(guò)許多標(biāo)準(zhǔn)，它們可與其他T輔助細(xì)胞類型區(qū)分開(kāi)，包括轉(zhuǎn)錄因子BCL-6和CXCR5的表達(dá)，CXCL13的受體將Tfh細(xì)胞募集到卵泡。它們的功能也是獨(dú)特的，因?yàn)樗鼈兺ㄟ^(guò)產(chǎn)生IL-21（一種輔助細(xì)胞因子，可有效刺激B細(xì)胞分化為抗體形成細(xì)胞）來(lái)提供與Th2細(xì)胞不同的B細(xì)胞幫助。
濾泡調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Follicular regulatory T cells,Tfr細(xì)胞)在分化早期，細(xì)胞因子受體及其它共刺激/共抑制信號(hào)協(xié)同啟動(dòng)了Treg細(xì)胞向Tfr細(xì)胞的分化信號(hào)，此信號(hào)的集合最終誘導(dǎo)Treg表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子Bcl-6及趨化因子受體CXCR5，分化為早期Tfr細(xì)胞。
白細(xì)胞介素35 (interleukin-35,IL-35)為IL-12家族的新成員，是由p35和Ebi3以共價(jià)鍵相結(jié)合形成的異源二聚體，主要通過(guò)抑制Thl7細(xì)胞分化和促進(jìn)調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞增殖在多種疾病的免疫調(diào)控中發(fā)揮免疫抑制作用。iTr35細(xì)胞為IL-35誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種新型誘導(dǎo)性Treg細(xì)胞亞群，具有長(zhǎng)期的功能穩(wěn)定性.因此,iTr35細(xì)胞和IL-35在免疫調(diào)控中具有重要作用。
我們常用的檢測(cè)指標(biāo)：CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。
【實(shí)驗(yàn)流程】
組織：制成單細(xì)胞懸液-溶血-離心去上清-調(diào)整細(xì)胞密度-加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機(jī)
血液：溶血-離心去上清-調(diào)整細(xì)胞密度-加入相應(yīng)的表面標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機(jī)
案例展示
注意事項(xiàng)
血液樣本量需提供5-10ml。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個(gè)細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
電話：400-691-6686
在線時(shí)間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號(hào)
湘公網(wǎng)安備