電鏡檢測
超微病理是運用電子顯微鏡高分辨力，看清原來在光學(xué)顯微鏡下看不清或看不到的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的細(xì)微結(jié)構(gòu)及其病理變化，并對其進(jìn)行研究的技術(shù)。
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實驗介紹
【技術(shù)原理】
超微病理是運用電子顯微鏡高分辨力，看清原來在光學(xué)顯微鏡下看不清或看不到的細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的各種細(xì)胞器和細(xì)胞核的細(xì)微結(jié)構(gòu)及其病理變化，并對其進(jìn)行研究的技術(shù)。
【實驗流程】
案例展示
技術(shù)總結(jié)
【常見問題】
1、取材時要迅速，組織從活體取下后應(yīng)在最短時間內(nèi)投入到固定液中；
2、樣本體積不能過大，以免影響固定劑的滲透；
3、電鏡標(biāo)本制作中要注意室內(nèi)的溫濕度，濕度不能超過40%；
4、電鏡標(biāo)本制作所用液體，需4℃冷藏。
【注意事項】
1、處理好的樣品為干燥無水固體，無易揮發(fā)溶劑；
2、觀察面應(yīng)該清潔，無污染物；
3、導(dǎo)電和導(dǎo)熱性能好；
4、電子束下樣品熱穩(wěn)性要好，且不會被電子束分解；
5、磁性較強樣品要預(yù)先去磁。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運輸條件 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 新鮮組織 | 新鮮取材組織，用 PBS 清洗干凈血液等，立即-80℃保存 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標(biāo)記，且標(biāo)記清晰可識 |
| 一般固定組織 | 一般組織體積不超過2cmX2cmX0.5cm，固定時盡量保持組織的原有形態(tài)并清理干凈血液及多余部分，如腸道內(nèi)容物；固定液體積為組織大小的10倍以上，容器足夠容納組織不使其擠壓變形。標(biāo)注好固定液類型和固定時長 | 常溫 | 常溫 | |
| 特殊固定組織 | 睪丸、眼球、脊髓、肌肉等組織：推薦使用對應(yīng)的特殊固定液進(jìn)行固定，以保證固定效果。如Bouin液，適用于睪丸組織、皮膚組織及眼球的固定 | |||
| 組織蠟塊 | 組織由標(biāo)準(zhǔn)的石蠟包埋盒包埋（尺寸為30*24*7mm），石蠟與組織要均勻接合，不能有裂痕；蠟塊厚度根據(jù)所需切片的數(shù)量而定，有效厚度至少要超過 0.1cm。盡量提供半年內(nèi)的組織蠟塊，超過半年的蠟塊抗原可能丟失，做免疫組化可能出現(xiàn)檢測不到蛋白。 | 常溫 | 常溫 | |
| 組織切片 | 需用防脫載玻片進(jìn)行撈片，并注明切片厚度、已烤片溫度與時間，組織應(yīng)在靠近切片下端 1/3 處。 | 4℃ | 冰袋 | |
| 細(xì)胞爬片 | 使用 12 孔板或 24 孔板專用細(xì)胞爬片，細(xì)胞爬片經(jīng)固定后用 PBS 洗滌 2~3 次，保存在 PBS 中，用封口膜密封孔板。每個爬片在孔板蓋上應(yīng)有唯一的標(biāo)記，并有電子版的分組信息，以防標(biāo)記在運輸途中模糊。 | 常溫 | 常溫 | |
| 植物樣本 | 新鮮組織FAA固定，木質(zhì)化程度不高；對于較薄的葉片，如果要求平行葉片切片，難以保證切完整；根莖要求直徑>1mm | 常溫 | 常溫 | |
| 抗體 | 保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識別此抗體的標(biāo)記，并附帶說明書，抗體的量應(yīng)大于實驗所需的量。組織切片、組織芯片按稀釋后 100μl 一張切片計算抗體用量， 24 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 200μl 一張計算抗體用量，12 孔板細(xì)胞爬片圓形蓋玻片按稀釋后 400μl 一張計算抗體用量。 | -20℃ | 冰袋或干冰 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
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