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實驗介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標記的單克隆抗體，與待測成分作用，然后上流式細胞儀檢測待測細胞。待測細胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列，一個個迅速通過激光聚焦區(qū)，激光在對每個細胞進行照射時可同時得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標記物發(fā)出的信號，利用這些信號，可計算出相對含量，從而得到細胞群的相對比值。
Th1細胞是IFN-γ+ IL-12極化的T輔助細胞，可驅(qū)動巨噬細胞的殺滅作用和對病原體的殺傷作用。它們的特征在于轉(zhuǎn)錄因子T-bet的表達，并產(chǎn)生細胞因子：IL-2，IFN-γ和TNF。
Th2細胞是IL-4極化的T輔助細胞，可刺激對感染的體液反應(yīng)，包括B細胞增殖，類別轉(zhuǎn)換和抗體產(chǎn)生增加。它們的特征在于轉(zhuǎn)錄因子GATA3的表達并產(chǎn)生細胞因子：IL-4，IL-5，IL-6，IL-10和IL-13。
Th9細胞是最近表征的T輔助細胞的子集，在預防細胞外寄生蟲（尤其是線蟲）中發(fā)揮作用。Th9細胞通過IL-4和TGF-β從幼稚細胞極化。盡管它們與Th2不同，但Th9細胞可以通過TGF-β的作用從Th2細胞衍生而來。盡管產(chǎn)生抗炎性IL-10，它們?nèi)耘c炎性疾病如過敏性炎癥相關(guān)。
Th17細胞是活化T輔助細胞的獨特子集，通常在上皮和粘膜屏障上提供抗微生物免疫。它們也與多種自身免疫疾病有關(guān)。Th17細胞的特征在于其細胞內(nèi)RORγt和STAT3的表達以及細胞因子（IL-17A，IL-17F，IL-21和IL-22）的產(chǎn)生。在人類中，可以使用CD4，CD161和CCR6的細胞表面標記物識別它們。
Th22細胞是促炎性T輔助細胞的新子集，其正常功能尚未完全確定，盡管建議它們參與皮膚免疫。它們與多種自身免疫性疾病有關(guān)，例如類風濕性關(guān)節(jié)炎，克羅恩氏病，牛皮癬和特應(yīng)性皮炎。盡管與具有細胞表面受體的Th17細胞和IL-22的產(chǎn)生表現(xiàn)出一些相似之處，但Th22細胞的特征在于其被TNF-α極化，芳基烴受體和CCR10的表達以及缺乏IL-17的產(chǎn)生。
我們常用的檢測指標：CD4、IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A、IL-22。
【實驗流程】
組織：制成單細胞懸液-溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的標記抗體-孵育-離心去上清-上機
血液：溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的表面標記抗體-孵育-離心去上清-上機
案例展示
注意事項
血液樣本量需提供5-10ml。
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 活細胞 | 樣本量：1*106個細胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
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